Что такое ПЦР анализ и вирусная нагрузка?

Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.

Вирус гепатита С. Чем он опасен. Как вовремя его идентифицировать.

Вирус гепатита С или ВГС – инфекционное заболевание, которое несет в себе молекулу рибонуклеиновой кислоты.

Этот тип вируса умеет легко приспосабливаться к условиям обитания и часто трансформируется в разные формы болезни, поэтому нашей защитной системе организма так сложно с ним справиться. Классифицируют шесть главных генетических типов инфекции и десятки подтипов. В наших краях зачастую встречаются первые три типа вируса.

По статистике лишь четверть случаев заболевания ВГС протекают без осложнений, во всех остальных случаях норма, если инфекция перерастает в хронический процесс, который пагубно влияет на внутренние органы. Так гепатит может осложняться печеночным фиброзом – процесс замены печеночных клеток. Дальше осложнения развиваются по цепной реакции: вследствие фиброза появляются раковые опухоли, болезнь печени перерастает в цирроз.

В большинстве случаев инфекция попадает в организм человека по кровеносным сосудам. Диагностируют вирус гепатита С несколькими методами. Отслеживают уровень концентрации антител к ВГС. Инфицирование не произошло, если в крови пациента не будут найдены антитела к ней. В противном случае вирус изучается более глубоко, проводят еще один тест – ПЦР. Только этот метод позволяет идентифицировать РНК вируса спустя всего полторы недели после заражения, во время, когда организм не успевает начать производство антител к инфекции, и последствия заражения никак не отражены на общем состоянии, тем более в результатах других исследований, таких как БАК и биопсия.

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Для справки! Диагностика гепатита С, опасного вирусного заболевания печени, стала возможной после внедрения в клиническую практику анализов с помощью ПЦР. До этого времени вирус оставался «невидимым» для исследователей, не реагируя на обычные методы определения инфекции.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

  • качественный;
  • количественный.

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Подводя итоги

На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.

Расшифровка анализа и нормы

Расшифровка анализа на вирусную нагрузку должна проводиться квалифицированным человеком, поскольку здесь важны точность и внимательность.

Примерные нормы концентрации вируса гепатита С:

  1. Если вирусная нагрузка находится в пределах 800 000 МЕ на мл крови, то речь идет о нормальном течении болезни.
  2. Если этот показатель повышается до 810 000 МЕ на мл крови и более, то речь идет о высокой вирусной нагрузке.
  3. Если концентрация падает до 600 000 МЕ на мл крови, значит, лечение дало результаты и болезнь начала постепенно отступать.

Обычно пациент получает расшифровку анализа крови через 5–7 дней после ее сдачи. Делать такой анализ придется через 4, 12 и 24 недели после начала лечения. Это необходимо для того, чтобы врач мог отследить состояние пациента и действенность терапии. Если концентрация вируса понижается, значит, лечение эффективно.

Расшифровка анализа и нормы

Иногда расшифровка показывает, что концентрация вируса рибонуклеиновой кислоты не падает, а, наоборот, растет. Это говорит о том, что лечение было подобрано неправильно и его необходимо срочно менять. Также количественный тест необходимо провести через полгода после вирусной терапии, чтобы убедиться, что заболевание находится в статусе ремиссии.

Читайте также:  Гепатит А – пути инфицирования, симптомы и профилактика

Иногда результаты такого исследования оказываются ложными. Возможно это в следующих случаях:

  • если человек подвержен развитию острой инфекции, исследование может показать ложный отрицательный результат;
  • при длительном хранении и замораживании биологического материала также может появиться ложный отрицательный результат;
  • ложный положительный возникает при наличии ревматоидного фактора;
  • аутоиммунные заболевания также приводят к ложному положительному результату.

Именно из-за сложности расшифровки заниматься трактовкой такого анализа должен исключительно профессионал.

Что значит вирусологическая нагрузка

При подозрении на гепатит С пациенту приходится сдавать множество анализов, названия которых понятны далеко не всегда. Попробуем разобраться в специальных медицинских терминах и обозначениях тестов, назначаемых врачом. Для обследования больного проводят анализы по двум основным методикам.

  1. Серологическое исследование. В лабораторном бланке часто обозначается как anti-HCV. Тест предназначен для выявления антител (иммуноглобулинов) к возбудителю гепатита С, которые достигают определяемого уровня на 4–6 неделе после заражения. Но по титру АТ к HCV можно только приблизительно определить тяжесть заражения.
  2. Молекулярные исследования. Включают несколько тестов. Обозначается как ПЦР (полимеразная цепная реакция). Анализ достаточно сложен в исполнении и позволяет установить РНК вируса в кровотоке. Самый простой тест – качественный, когда определяют только присутствие HCVв сыворотке. Количественный позволяет выяснить точное количество копий РНК в 1 мл крови. При помощи генотипирования устанавливают структуру вириона и точную разновидность HCV (I–VI).

Количественную ПЦР проводят не сразу. Максимально возможной чувствительностью характеризуются тест-системы, используемые для постановки качественного исследования. Но высокая стоимость анализа ограничивает его повсеместное применение. Для рутинной диагностики применяют более простой в проведении ИФА.

Дальнейшее обследование проводят при позитивном ИФА. Ранее качественная ПЦР считалась более чувствительной, чем количественная. Но современные тест-системы позволяют определить количество вируса гепатита С в крови при показателях 5 МЕ/мл и выше.

Что значит вирусологическая нагрузка

Лаборатории могут использовать разные наборы для постановки количественного анализа. Поэтому все исследования лучше проводить в одном месте, чтобы не допустить погрешности в показаниях тестов.

Какая вирусная нагрузка бывает при гепатите С? Для ответа на этот вопрос используют не только числовые показатели.

Для удобства диагностики и прогнозирования исхода заболевания виремию делят на группы:

В некоторых медицинских источниках дополнительно используют термины «умеренная» и «очень высокая». На многих форумах пациенты нередко жалуются на погрешности при проведении количественной ПЦР. Дело в том, что разные тест-системы могут отличаться по интерпретации результатов. Если ранее виремию обозначали в копиях РНК/мл, сейчас все современные лаборатории указывают показатель в Международных Единицах ( МЕ/мл).

Расшифровка показателей в результатах анализов

На этапе количественной оценки виремии пациент уже находится под наблюдением врача. Если результат первичного анализа (anti-HCV) вызывает сомнения, терапевт направляет больного к узкому специалисту. Это либо инфекционист, либо гепатолог.

Если определяется вирусная нагрузка при гепатите С, расшифровка должна проводиться только врачом. Но общепринятые варианты трактовки представлены в таблице ниже.

Результаты исследований Описание
8×105 МЕ/мл и более Высокая виремия
7,9×105 МЕ/мл и менее Низкая виремия
Некоторые зарубежные специалисты считают, что критическая граница между высокой и низкой вирусологической нагрузкой составляет 4×105 МЕ/мл
Виремия не определяется РНК возбудителя либо отсутствует, либо его количества недостаточно для лабораторного определения

Отсутствие генетического материала HCV в крови является вариантом нормы.

Норма

При первичном обследовании, когда подтвержден диагноз гепатита С, о норме при количественном определении вируса речь не идет. РНК патогена будет обнаружено в крови в любом случае. Но во время лечения нормой считается отсутствие возбудителя HCV в плазме уже к середине курса терапии.

Необнаруживаемый уровень HCV на 4–6 неделе приема медикаментов служит предиктором успешного лечения. При этом анализ следует выполнять максимально чувствительными методами, которые смогут определить содержание патогена в количестве 5 МЕ/мл и выше. Нормой считают отсутствие вируса после окончания медикаментозной терапии.

Высокая

Высокой является виремия от 8×104 МЕ/мл и более (некоторые авторы называют число в два раза ниже – 4×104 МЕ/мл). Подобные показатели – один из неблагоприятных факторов течения патологии, говорят в пользу очень активной репликации вируса, быстром распространении HCV. Чем больше параметры виремии, тем выше вероятность развития осложнений – цирроза, фиброза, асцита, внепеченочных проявлений гепатита.

В таких случаях нужно особое внимание уделить состоянию печени. Обычно врач проводит все возможные лабораторные и инструментальные исследования, чтобы получить максимально полную картину и исключить скрытые патологии. Также слишком большие показатели виремии (особенно при невысоких титрах либо отсутствии антител) могут быть следствием проблем с иммунитетом (ВИЧ, иммунодепрессивные состояния и т.д.).

При отсутствии цирроза и коинфекций прописывают стандартную схему терапии (комбинации с софосбувиром). Если виремия снижается недостаточно быстро либо остается на прежнем уровне, принимают решение о смене тактики лечения.

Высокая виремия в сочетании с фиброзом и циррозом, требует серьезного подхода. Назначают длительный курс терапии, иногда показана трансплантация органа. В таком случае (если до пересадки остается полгода и менее) лечение не начинают, а проводят уже после хирургического вмешательства.

Низкая

Если виремия составляет ниже 8×105 МЕ/мл, говорят о низкой вирусной нагрузке. Что означает такой показатель? Цифры служат предиктором выздоровления. При минимальном содержании патогена возможно носительство, когда HCV не прогрессирует, но это не означает пожизненного латентного течения болезни. Часто активизация процесса происходит спонтанно и незаметно для пациента.

Читайте также:  Анализы на гепатит: диагностика заболеваний печени

К причинам сниженной виремии относят:

  • хорошую работу иммунной системы;
  • правильное питание с ограничением (в идеале, исключением) тяжелой для печени пищи;
  • строгое ограничение алкоголя;
  • отсутствие лекарственного гепатотоксического воздействия;
  • отсутствие коинфекций.

Иногда невысокое число виремии отмечают на фоне недавнего заражения. В таком случае доктора оценивают состояние пациента. При благоприятном прогнозе лечение не начинают, предоставляя иммунитету «возможность» самостоятельно побороть инфекцию.

При хроническом течении патологии на фоне низкой ВН лечение начинают незамедлительно. Однако отсутствие яркой активности HCV предполагает 100% положительный результат терапии практически у всех пациентов. Но минимальная виремия уже после проведенного курса приема противовирусных средств служит признаков возможного рецидива либо повторного заражения.

Могут ли быть ошибки в результатах анализа

Погрешности в ПЦР-диагностике – редкость. Но если полученные данные противоречат результатам других исследований, проводят повторный анализ. Не исключены ложноположительные результаты при:

  • приеме лекарств от ВИЧ-инфекции;
  • обострениях инфекционных болезней;
  • беременности;
  • аутоиммунных нарушениях.

Небольшая нагрузка при повышенном уровне печеночных ферментов в 90% случаев свидетельствует о ложноотрицательном результате.

Ошибки в измерениях иногда связаны с:

  • нарушением правил асептики при заборе крови;
  • неправильным хранением биоматериала;
  • загрязнением исследуемой крови химическими реагентами;
  • низкой квалификацией лаборантов;
  • забором крови во время лечения препаратами гепарина.

Незначительные погрешности возможны при проведении ПЦР-исследования в разных лабораториях. Поэтому гепатологи и гастроэнтерологи советуют в течение всего периода лечения гепатита сдавать анализы в одной и той же клинике.

Инфекционная нагрузка отражает тяжесть течения болезни. По полученным данным определяют подходящую дозу противовирусных лекарств, оценивают результативность терапии. В случае параллельного генотипирования вируса удается не только подобрать медикаменты от гепатита, но и спрогнозировать терапевтический ответ.

Влияние показателя на лечение и прогноз

В настоящее время лечение гепатита С мало зависит от параметров виремии. Ключевую роль играет разновидность HCV. Если выявлен I генотип патогена и показатели виремии слишком высоки, предпочтение отдают препаратам последнего поколения. К примеру, вместо софосбувира с даклатасвиром или другими лекарствами прямого действия, прописывают Викейру Пак.

Темпы снижения виремии характеризуются термином «вирусологический ответ» (или сокращенно ВО).

В зависимости от сроков уменьшения концентрации HCV в крови различают:

  • ранний ВО – снижение виремии до неопределяемых концентраций на 12 неделе терапии;
  • очень ранний ВО – отсутствие показателей на 4 неделе терапии;
  • устойчивый ВО – сохранение негативного результата на протяжении полугода после окончания лечения;
  • возврат вирусной инфекции – повышение виремии после кратковременного снижения;
  • рецидив HCV – повторное появление вируса после успешного лечения.

Задача врача – добиться устойчивого вирусологического ответа, предикторами которого служит отсутствие виремии на 4 или 12 неделе лечения.

В целом, при нормальном состоянии печени (без цирроза) благоприятный прогноз вероятен и при высоком содержании HCV. Хотя гепатит С часто протекает без каких-либо клинических признаков, вполне реально вовремя диагностировать патологию. Для этого рекомендовано ежегодное проведение anti-HCV, а после перенесенного заболевания – качественное определение вируса методом ПЦР.

Гепатит С является одним из самых опасных заболеваний, известных в настоящее время. Эта болезнь не просто так прозвана «ласковым убийцей» — в большинстве случаев это заболевание протекает без ярко выраженной симптоматики. Однако ВГС чрезвычайно опасен, так как при отсутствии должного лечения очень быстро разрушает печени. Поэтому заболевание следует диагностировать и начать лечить как можно быстрее.

В процессе постановки диагноза в числе прочих нюансов выявляется и вирусная нагрузка при гепатите С, норма и критический порог которого строго определены. Но для чего делается подобный анализ? Какая вирусная нагрузка при гепатите С считается высокой? Ответы на все эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Лечение

Если у человека диагностирован гепатит С, ему обязательно назначается противовирусная терапия, необходимая для уничтожения возбудителя, а также для того, чтобы улучшить структуру ткани печени.

При лечении используются одновременно иммунодепрессанты, Интерферон и препараты цитокинов. Все они назначаются исключительно врачом и не используются по собственному желанию. Необходимо категорически отказаться от употребления алкогольной продукции. Помимо этого, может использоваться комбинированная терапия Рибавирином и Пегинтерфероном, что позволяет избавиться от опасного вируса. Длительность такой терапии напрямую зависит от генотипа проникшего вируса. Например, если имеет место первый генотип, то лечение длится на протяжении целого года, остальные варианты подразумевают терапию на протяжении всего полугода.

В качестве иммуномодуляторов используются Глутоксим, Имунофан и Гепон.

Сильным противовирусным эффектом обладают и гепатопротекторы, например,Эссенциале, Фосфолиглив. Они необходимы для поддержки печени и повышения её функциональности. Они позволяют снизить показатель вирусной активности гепатита.

Во время приёма лекарственных средств у пациента могут возникнуть неприятные симптомы в виде аллергической реакции, тошноты, рвоты и проблем с желудочно-кишечным трактом. В таких ситуациях рекомендуется отказаться от приёма препаратов и обратиться за помощью к врачу, который впоследствии может заменить неподходящий препарат на другой.

Опасно применение таких препаратов во время вынашивания ребёнка, при циррозе, сахарном диабете и аутоиммунных заболеваниях. А также сердечная недостаточность, патологии щитовидной железы и аллергические реакции являются противопоказанием к лекарственной терапии.

Вне зависимости от того при какой вирусной нагрузке назначают терапию, необходимо регулярно сдавать анализы крови, чтобы понимать насколько эффективно назначенное лечение.

Но помимо использования лекарственных средств, больной должен вести здоровый образ жизни и отказаться от употребления в пищу жаренного, острого и жирного. В рацион питания необходимо добавить овощи и мясо, приготовленные на пару.

Симптомы и причины развития гепатита С

Заражение гепатитом чаще всего происходит через кровь или во время незащищенного полового акта. В группе риска находятся наркоманы, а также люди, подвергшиеся переливанию зараженного биологического материала.

Развитие гепатита происходит постепенно, и на первых этапах человек может даже не замечать тревожные симптомы. Однако негативное воздействие на печень уже оказывается, что в будущем приводит к резкому снижению функциональных возможностей органа. Следующие симптомы свидетельствуют о развитии болезни:

  1. Тошнота или неконтролируемые позывы к рвоте.
  2. Сильная слабость, низкая работоспособность.
  3. Головные боли, а также неприятные ощущения в области правого подреберья.
  4. Отсутствие аппетита и проблемы с функционированием ЖКТ.
  5. Незначительное повышение температуры тела.

При гепатите С признаки желтухи возникают не сразу. Печень еще несколько месяцев может функционировать в прежнем режиме, но постепенно, по мере размножения вируса, самочувствие пациента все равно будет ухудшаться.

Если кожа начинает желтеть, покрываться сыпью или красноватыми пятнами разного размера, то речь определенно идет о развитии опасного заболевания. Изменить цвет могут и слизистые, в том числе и зрачки. Именно на этой стадии пациенты чаще всего и обращаются к врачу, упустив ранний период развития болезни, когда было проще всего справиться с нею.

Какой анализ нужно сдать для определения вирусной нагрузки при гепатите C

Если в крови пациента выявляется РНК вирус, то возникает надобность уточнить количественный показатель данного параметра, требуется некая вирусная нагрузка.

На сегодняшний день для выявления ВН используют 3 виды лабораторных анализов.

  • Для тестирования часто используется транскрипция амплификации, которая может выявить в кровяном русле нуклеиновые кислоты.
  • Используется также исследование разветвленной ДНУ, но минут такого метода в том, что он низкочувствителен к малым концентрациям вируса. Этот метод прост в использовании и не дорогостоящий.
  • Метод ПЦР — самый высоко чувствительный к вирусу гепатита С, именно по этой причине чаще всего именно его применяют для определения ВН.

Для теста используют кровь из вены. Перед анализом с утра не нужно кушать, курящие люди должны не курить хотя бы за 30-40 минут перед проведением анализа.

Подготовка к сдаче крови

Сдача биоматериала на проведение анализа происходит из вены. Особых рекомендаций по подготовке нет, поэтому актуальны стандартные правила, которые нужно соблюдать перед сдачей крови на исследование:

  1. Делать это лучше утром натощак (последний прием пищи должен быть не ранее 8-12 часов до сдачи).
  2. Если забор крови происходит не утром, то на завтрак нельзя употреблять жирную пищу (интервал в 8-12 часов также должен соблюдаться).
  3. Отказаться от алкоголя, жирной и жаренной еды за 1-2 дня до исследования.
  4. Не приходить на анализ на следующий день после праздничного застолья.
  5. Курение запрещено как минимум за час до сдачи биоматериала.
  6. Перед забором крови стоит посидеть 10-15 минут в спокойствии, чтобы расслабить тело, исключить влияние на результаты напряжения, как физического, так и психологического.
  7. Если принимаете какие-либо лекарственные средства или им подобные препараты, то анализ можно сдавать спустя 10-14 дней после последнего их приема. (об этом факте необходимо сообщить врачу, возможно он установит иное условие).
  8. Биоматериал не сдается сразу после выполнения ректального исследования, рентгенографии, физиотерапевтических процедур.
  9. Первоначальный и повторный анализы лучше сдавать в одной и той же лаборатории (медицинском учреждении), так они разные заведения могут использовать различные реагенты, оборудование, единицы измерения и точность.

Показания

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

  • определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
  • качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
  • нахождение острого и хронического гепатита С;
  • существование микст-гепатитов;
  • при планировании лечения;
  • если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.